과당의 분자 특성 및 면역 효능

기생충 및 벡터 16권, 기사 번호: 169(2023) 이 기사 인용

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측정항목 세부정보

진드기는 인간, 야생 동물 및 가축에게 다양한 병원균을 전염시키는 절대 조혈성 체외 기생충입니다. 예방접종은 진드기 퇴치를 위한 효과적이고 환경친화적인 방법입니다. FBA(과당-1,6-비스인산 알돌라제)는 기생충에 대한 후보 백신인 중요한 당대사 효소입니다. 그러나 진드기에서 FBA의 면역 보호는 불분명합니다.

363개 아미노산 단백질을 암호화하는 HlFBA(Haemaphysalis longicornis) FBA의 1092bp 오픈 리딩 프레임(ORF)을 PCR 방법을 사용하여 클로닝했습니다. 원핵생물 발현 벡터 pET32a(+)-HlFBA를 제작하고 단백질 발현을 위해 Escherichia coli BL21(DE3) 균주의 세포에 형질전환시켰다. 재조합 HlFBA 단백질(rHlFBA)은 친화성 크로마토그래피로 정제되었으며, 웨스턴 블롯 결과는 rHlFBA 단백질이 면역원성임을 시사했습니다.

효소 결합 면역흡착 분석 결과, rHlFBA로 면역화된 토끼는 rHlFBA에 특이적인 체액성 면역 반응을 나타내는 것으로 나타났습니다. 진드기 감염 시험에서는 히스티딘 태그가 붙은 티오레독신(Trx) 그룹의 진드기와 비교하여 울퉁불퉁한 진드기 무게와 암컷 진드기의 산란 및 rHlFBA 그룹의 진드기 알 부화율이 22.6%, 45.6% 감소한 것으로 나타났습니다. 각각 24.1%. 이들 세 가지 매개변수의 누적 효과를 토대로 rHlFBA의 전반적인 면역 효능은 68.4%로 추정되었습니다.

FBA는 충혈된 진드기 무게, 산란 및 알 부화율을 크게 줄일 수 있는 진드기 방지 백신 후보입니다. 포도당 대사에 관여하는 효소를 사용하는 것은 진드기 방지 백신 개발의 새로운 전략입니다.

필수 혈액 공급 절지동물인 진드기는 전 세계적으로 인간과 동물의 주요 병원체 매개체입니다[1]. 진드기와 진드기가 옮기는 미생물은 인간과 수의사의 건강에 심각한 위협이 됩니다[2]. Haemaphysalis longicornis(Acari: Ixodidae)는 동부 아시아가 원산지인 진드기 종이며 호주, 뉴질랜드 및 여러 태평양 섬에 정착했습니다[3]. Theileria uilenbergi, Babesia motasi, Rickettsia hebeiii 및 Anaplasma phagocytophilum과 같은 병원균을 전염시킵니다 [4,5,6,7]. 또한 인간과 동물의 건강을 위협하는 SFTSV(중증열성혈소판감소증후군 바이러스)의 매개체이기도 합니다[8]. 따라서 항H 항체의 개발이 필수적이다. longiconis 백신[9, 10].

Galayet al. H. longicornis (HlFER)의 두 종류의 철 결합 단백질 페리틴, 즉 세포 내 HlFER1과 분비성 HlFER2를 진드기 방지 백신으로 평가했습니다 [11]. 웨스턴 블롯 결과는 항체가 재조합 HlFER(rHlFER)과 교차반응하고 또한 천연 HlFER과도 반응한다는 것을 입증했습니다. 진드기 공격 실험에서는 rHlFER2를 접종한 토끼에게 먹이를 준 진드기가 대조군의 진드기보다 충혈 체중이 더 낮았다는 사실이 입증되었습니다. rHlFER를 접종한 그룹 모두에서 산란율과 부화율이 감소했습니다. rHlFER1과 rHlFER2의 백신 효능은 각각 34%와 49%였다[11]. 또 다른 연구에서는 H. longicornis subolesin(HlSu)의 오픈 리딩 프레임(ORF)이 확인되었고 대장균에서 발현되는 재조합 HlSu(rHlSu)가 확인되었습니다[12]. rHlSu로 면역화된 토끼는 면역 반응을 일으켰습니다. rHlSu 면역군에서는 암컷 진드기의 울혈 체중과 산란이 대조군에 비해 현저히 낮았습니다. 계산된 백신 효능은 37.4%로 추정되었다[12]. 후속 연구에서 Wang et al. 재조합 단백질(rHlLIP)을 얻기 위해 H. 롱기코니스 리포칼린 동족체(HlLIP) 유전자를 pET-32(a+)에 클로닝하고; RH1LIP의 면역원성은 웨스턴 블롯으로 확인되었다[13]. H. longicornis에 감염된 토끼에 대한 예방접종 시험에서는 rHlLIP 단백질에 대한 항체가 울혈 중량, 산란 및 부화율을 감소시키는 것으로 나타났습니다(rHlLIP 단백질의 백신 효능은 60.17%였습니다). 그러나 현재까지 상업적인 항H. longicornis 백신은 현재 이용 가능하지 않으므로 H. longicornis 감염에 대한 효율적인 보호 항원을 선별하는 것이 중요합니다.